活性氧(reactive oxygen species , ROS)是體內(nèi)一類氧的單電子還原產(chǎn)物,，是電子在未能傳遞到末端氧化酶之前漏出呼吸鏈并消耗大約2 %的氧生成的，包括氧的一電子還原產(chǎn)物超氧陰離子(O2·-)、二電子還原產(chǎn)物過氧化氫(H2O2)、三電子還原產(chǎn)物羥基自由基(·OH)以及一氧化氮等。
    ROS 的產(chǎn)生主要是線粒體由狀態(tài)Ⅲ向狀態(tài)Ⅳ轉換中高氧的環(huán)境和高還原態(tài)的呼吸鏈使大量電子漏出并還原氧分子而形成。

檢測方法
1、化學反應法
由于活性氧具有較高的反應活性, 它們可以與許多不同的化合物發(fā)生化學反應, 由此產(chǎn)生各種不同的反應生成物, 根據(jù)這些反應生成物或者反應物的變化程度可以進行定量或者定性分析。通常采用的儀器分析方法有, 化學發(fā)光法 、紫外-可見吸收分光光度法 、熒光光度法 、電子自旋探針 以及選擇性電極法等?；瘜W反應法的特點是測定靈敏度高、廉價、操作簡便等。但是, 化學反應法的特異性相對比較差, 一些氧化還原反應或者酶催化反應往往對測定結果的判斷產(chǎn)生影響, 一般需要其他分析方法作為比較, 才能獲得滿意的結論。

2、化學發(fā)光法
化學發(fā)光測定法是儀器分析中靈敏度較高的方法之一, 已在醫(yī)學、環(huán)境以及工業(yè)分析等許多領域里得到廣泛的應用 。活性氧的化學發(fā)光研究也是活性氧測定法研究領域中比較活躍的分支之一, 特別是針對H2O2 測定, 有許多靈敏度高、選擇性好的化學發(fā)光體系 。進年來, 筆者在H2O2 測定方面開發(fā)了一系列高靈敏度的化學發(fā)光分析法。除此之外, 目前比較成功的活性氧化學發(fā)光測定法主要有魯米諾法(luminol)、光澤精法(lucigenin)和cypridina luciferin analog(CLA)法。
3、分光光度法
活性氧的分光光度測定, 常用的方法有細胞色素丙(cytochrome C)的超氧自由基還原法 和硝基四氮唑籃(nitro blue tetrazolium ,NBT)還原法 。具有氧化活性的細胞色素C 被·O-2 還原后, 形成了在波長550 nm 處有強吸收的亞鐵細胞色素 , 可以用于O-2 的直接測定, 在SOD 存在下,O-2 受到SOD 的催化形成H2O2 和O2 , 以被開發(fā)為SOD 的間接定量分析法 。 
但是, 活性氧的細胞色素丙還原法存在著其它還原性物質, 如HADPA 和還原性酶的干擾, 一般情況下無法直接用于O-2 的定性分析, 需要比較在SOD 的存在下, 是否還有O-2 與細胞色素丙發(fā)生反應的結果, 從而判斷O-2 的生成與否。

4、熒光光度法
與化學發(fā)光一樣, 熒光分光光光度法也是靈敏度高, 操作簡便的分析方法之一。比較典型的例子是, 二氯熒光素(DCFH)在過氧化物酶存在下, 被H2O2 或者HO-2 氧化形成具有有螢光的DCF , 可以有效地應用于H2O2 定量分析[ 23] 。利用2 , 3-二氨基萘(DAN)與NO-2 在酸性條件下發(fā)生反應, 形成熒光性的1-(H)-萘三氮茂環(huán), 有人提出用2 , 3-二氨基萘(DAN)作為NO 的測定方法。